目的用纯化的人血管生成素2(Ang2)蛋白,通过噬菌体展示技术从非免疫小鼠噬菌体展示抗体库中淘选、鉴定Ang2单链抗体。方法以纯化的人Ang2蛋白为抗原,对非免疫小鼠噬菌体展示抗体库进行富集和筛选,获得Ang2单链抗体,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Westernblot法检测目的蛋白的表达并测序。结果经过3轮富集和筛选,获得了1个能特异性识别Ang2蛋白的阳性噬菌体克隆,DNA测序表明其含有完整的单链抗体基因片段,大小约750bp,表达蛋白相对分子质量约33.7×10~3;通过SDS-PAGE进一步实现Ang2单链抗体(phage-Ang2-scFv)的鉴定。结论成功分离并鉴定人Ang2-scFv,为进一步的功能学研究奠定了基础。
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